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    技術支持

    層粘連蛋白胚胎干細胞培養基的培養條件介紹
    更新時間:2024-03-04   點擊次數:68次
    層粘連蛋白(Laminin)胚胎干細胞培養基是一種常用的培養基,用于促進和維持胚胎干細胞的生長和自我更新。以下是一般的操作流程:  
    準備工作:  
    確保操作區域干凈整潔,并做好手部衛生。  
    準備好所需器材,包括培養皿、離心管、移液器等。  
    制備培養基:  
    根據實驗室制定的配方,將各種組分按比例混合制備完整的Laminin胚胎干細胞培養基。通常包括DMEM/F12或者Essential8介質等。  
    細胞預處理:  
    從合適來源(如小鼠或人類)獲取所需的新鮮或冷凍保存的低通行證級別(P0-P4)ES細胞。  
    在含有FeederLayer或無FeederLayer條件下進行擴增。  
    若使用無FeederLayer條件,則需要預先在耐熱涂層料中涂覆Laminin以提供粘附支持。  
    細胞孵育:  
    小心地將已經預處理過并懸浮在適當培養基中的ES細胞種植在含有Laminin的預涂層皿中。  
    盡量避免過度密集,以保證單個細胞形成分離生長。  
    培養條件的維護:  
    在恒溫孵育箱中將培養皿放置在37°C和5%CO2/空氣混合氣體環境下進行培養。  
    定期更換培養基,以去除代謝產物并提供新的營養物質。  
    細胞密度過高時,可進行適當的稀釋以保持細胞生長和功能。  
    細胞檢查和分析:  
    使用顯微鏡觀察細胞形態、增殖情況及表型變化。  
    可通過流式細胞術、實時定量PCR等方法對ES細胞進行表型和功能分析。  
    請注意,具體操作步驟可能會根據實驗室內特定要求、來源及目標應用而有所不同。因此,請根據實際情況調整操作步驟,并參考相關文獻或咨詢專業人員以獲取最佳結果。

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